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vendredi 10 octobre 2014

#SunTag #GFP #multimérisation #protéines Système d’étiquetage protéique pour amplification de signal dans l’expression génique et l’imagerie par fluorescence

Un système d'étiquetage protéique, le Sun Tag, est en développement afin de permettre l'imagerie à long terme et l'amplification de l'activation transcriptionnelle CRISPR dans les cellules vivantes.
Source iconographique et légendaire: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0092867414012276 
Les signaux relatifs à de nombreux processus biologiques peuvent être amplifiés par le recrutement de copies multiples de protéines régulatrices au niveau du site d’action. En exploitant ce principe, nous avons développé une protéine d’échafaudage, réseau peptidique formé de séquences répétées nommé Sun Tag, capable de recruter de multiples copies d’une protéine de fusion d’anticorps. Nous montrons que le Sun Tag est capable de recruter jusqu’à 24 copies de protéine fluorescente verte (GFP – Green Fluorescent Protein dans le texte), permettant ce faisant la pratique d’une imagerie de suivi durable dans l’espace intercellulaire de protéines uniques dans les cellules vivantes. Nous utilisons aussi le Sun Tag pour créer un facteur de transcription synthétique puissant constitué de copies multiples d’un domaine d’activation transcriptionnelle et d’une protéine CRISPR/Cas9* déficiente en nucléase ; et démontrons l’existence une forte activation de l’expression génique endogène et un comportement cellulaire remanié avec ce système. Ainsi, le Sun Tag fournit une plateforme polyvalente pour la multimérisation des protéines sur une matrice protéine d’échafaudage cible ; ce système est susceptible d’avoir de multiples applications en imagerie et dans le contrôle des processus de production des systèmes biologiques. Marvin E. Tanenbaum et al, dans Cell, publication en ligne en avant – première, 9 octobre 2014

*Voir http://tecfa-bio-news.blogspot.co.uk/2013/09/bio-tremplins-crispr-le-couteau-suisse.html pour une description complète de la protéine CRISPR/Cas9

Source : Science Direct / Traduction et adaptation : NZ