#Cell #cro-EM #bactérie #protéinedemembrane Les structures visibles en cryo-microscopie électronique révèlent plusieurs étapes du repliement des protéines de la membrane externe bactérienne

Etapes du repliement de feuillet β (EspP) par des intermédiaires multiples appelés "tonneaux hybrides" 

Les protéines des tonneaux β transmembranaires sont repliées dans la membrane externe (OM) des bactéries Gram-négatives par la machinerie d'assemblage des tonneaux β (BAM) via un processus mal compris qui se produit sans sources d'énergie externes connues. Ici, nous avons utilisé la cryo-microscopie électronique (cro-ME) à une seule particule pour visualiser la dynamique de repliement d'un modèle de protéine de tonneau β (EspP) par BAM. Nous avons constaté que BAM lie le motif "signal β" hautement conservé d'EspP pour orienter correctement les brins β dans la OM pendant le repliement. Nous avons également constaté que le repliement d'EsP se déroule via des intermédiaires appelés «tonneaux hybrides» dans lesquels des feuilles β intégrées à la membrane sont attachées à la sous-unité BAM essentielle, BamA. Les structures montrent une déviation sans précédent de la membrane entourant les intermédiaires EspP et suggèrent que les feuillets β se plient progressivement vers BamA pour former un tonneau β. Parallèlement aux expériences in vivo qui ont suivi le pliage du tonneau β alors que la tension de l'OM était modifiée, nos résultats soutiennent un modèle dans lequel BAM exploite l'élasticité de l'OM pour accélérer le pliage du tonneau β. Matthew Thomas Doyle, et al, dans Cell, publication en ligne en avant-première, 15 mars 2022

Source iconographique, légendaire et rédactionnelle : Science Direct / Préparation post : NZ 

#Cell #biologiecellulaire #cholestérol #bouclesluminales Les structures de scap mettent en évidence le rôle clé de la rotation des boucles luminales entrelacées dans la détection du cholestérol

Deux Conformations d'un Détecteur du Cholestérol
Wild - Type Scap = protéine Scap de type sauvage
Mutant Scap = protéine Scap mutée
TM = Transmembranaire
Overlaid Structures = Structures Superposées
Low Cholesterol; High Cholesterol = Niveau de Cholestérol bas; Niveau de Cholestérol élevé
Transport; Synthesis = Transport; Synthèse

La protéine de détection du cholestérol Scap induit la synthèse du cholestérol en transportant des facteurs de transcription liés à la membrane appelés protéines de liaison aux éléments régulateurs des stérols (SREBP) du réticulum endoplasmique (RE) vers l'appareil de Golgi pour l'activation protéolytique. Le transport nécessite une interaction entre les deux boucles luminales du RE de Scap (L1 et L7), qui flanquent un domaine intramembranaire de détection des stérols (SSD). Le cholestérol inhibe le transport de Scap en se liant à L1, ce qui déclenche la liaison de Scap à Insig, une protéine de rétention du RE. Ici, nous avons utilisé la cryo-microscopie électronique (cryo-EM) pour élucider deux structures de Scap de poulet pleine longueur : (1) un type sauvage exempt d'Insigs et (2) Scap mutant lié à l'Insig de poulet sans cholestérol. Étonnamment, L1 et L7 s'entrelacent étroitement pour former un domaine globulaire qui agit comme une plate-forme luminale reliant le SSD au reste de Scap. En présence d'Insig, cette plate-forme subit une grande rotation accompagnée d'un réarrangement des hélices transmembranaires de Scap. Nous postulons que ce changement de conformation arrête le transport Scap des SREBP et inhibe la synthèse du cholestérol. Daniel L. Kober, et al, dans Cell, publication en ligne en avant-première, 16 juin 2021

Source iconographique, légendaire et rédactionnelle : Science Direct / Préparation post : NZ